ISSN 0236-3933. Вестник МГТУ им. Н.Э. Баумана. Сер. «Приборостроение». 2012
109
ценции клеток и мембран, связанных с зондом, можно определить
полярность микроокружения флуорофора. Интенсивность и время
жизни флуоресценции зонда характеризуют подвижность сольватной
оболочки, поляризация флуоресценции — вращательную подвиж-
ность, ориентацию и вязкость микроокружения зонда. Тушение флу-
оресценции зонда посторонними веществами позволяет установить
доступность флуорофора для тушителя, его локализацию в белках и
мембранах клеток и их проницаемость для тушителей, скорость диф-
фузии. По переносу энергии возбуждения с мембранных белков на
флуоресцентный зонд и по степени эксимеризации зонда можно
определить концентрацию элементов зонда, расстояние между флуо-
рофорами и вязкость среды, окружающей зонд [1].
Поскольку чувствительность флуоресцентного метода очень вы-
сока, для его применения необходимы не менее чувствительные про-
боры. В лабораторной и научно-исследовательской практике для ре-
гистрации спектров флуоресценции применяют спектрофлуоримет-
ры. Основными их узлами являются источник возбуждающего света,
монохроматоры для выделения как возбуждающего, так и испускае-
мого света, фотоумножители и регистрирующее сигнал электронное
устройство (компьютер). Спектрофлуориметр должен снабжаться
универсальными и надежными оптическими деталями — затворами,
системой расщепления светового пучка, поляризаторами, дифракци-
онными решетками, оптическими фильтрами и др. В свою очередь,
каждый из узлов прибора должен соответствовать максимальным
требованиям, предъявляемым к работе идеального спектрофлуори-
метра [2], а именно:
– источник света должен иметь постоянный выход фотонов на
всех длинах волн;
– монохроматор должен пропускать фотоны всех длин волн с
равной эффективностью;
– эффективность монохроматора не должна зависеть от поляри-
зации;
– приемник (фотоумножитель) должен регистрировать фотоны
всех длин волн с одинаковой эффективностью;
– возможность с высокой точностью исследовать вещества в ме-
стах с ограниченным доступом.
К сожалению, одновременно выполнить поставленные задачи не-
возможно. Поэтому в настоящее время для получения и регистрации
спектров флуоресценции используют спектрофлуориметры различ-
ных видов [3].
В последние годы взгляд на измерительную технику претерпел
существенные изменения, значительно возросли требования, предъ-
1 3,4,5,6